MANUAL DE PRÁCTICAS DEL LABORATORIO DE BACTERIOLOGÍA MÉDICA

1.       INTRODUCCIÓN

Bacteriología es la ciencia que estudia las bacterias, incluyendo su clasificación, y la prevención de enfermedades de etiología bacteriana. Las materias que componen la bacteriología son objeto de estudio no sólo de los microbiólogos, sino también de químicos, bioquímicos, genetistas, patólogos, inmunólogos y médicos.

Aunque el desarrollo de esta ciencia no comenzó hasta después del descubrimiento del microscopio, antes de este hecho se sabía de “seres invisibles” que ocasionaban enfermedades.

El descubrimiento de los microorganismos estuvo relacionado con la invención del microscopio. En 1664 Robert Hooke describió los cuerpos fructíferos de mohos, pero la primera persona que vio microorganismos a detalle fue Antonie Van Leeuwenhoek, aficionado a construir microscopios, quien en 1684 utilizó microscopios simples fabricados por el mismo.

Esta doctrina de la "generatio spontanea" o abiogénesis, fue puesta en entredicho por los experimentos de Francesco Redi.

Pero no fue hasta que el francés Louis Pasteur cuyo trabajo fue el mas riguroso y convincente, que se desecho la teoría de la generación espontánea.

La primera clasificación sistemática de las bacterias fue publicada en 1872 por el biólogo alemán Ferdinand J. Cohn, que las situaba en el reino Vegetal. Hoy en día forman parte del reino Móneras. En 1876 Robert Koch, que ya había diseñado el procedimiento de inocular las bacterias directamente en un medio nutriente para cultivarlas y estudiarlas, identificó a una bacteria como agente etiológico del carbunco.

En 1880 se inició el conocimiento científico de la inmunidad frente a las bacterias: Pasteur descubrió que el Bacillus anthracis cultivado a una temperatura entre 42 y 43 °C pierde toda su virulencia tras varias generaciones, y más tarde se descubrió que los animales inoculados con estas bacterias debilitadas eran resistentes a la infección. Desde esa fecha se puede decir que nació la prevención, modificación y tratamiento de las enfermedades mediante la inmunización, uno de los avances más importantes de la medicina actual.

Otros avances importantes de la bacteriología fueron los descubrimientos de los agentes causales de la melioidosis (1862), la fiebre recurrente (borreliosis 1868), la fiebre tifoidea (1880), el tétanos (1885), la tuberculosis (1890), la peste bubónica (1894), la disentería bacilar (1898), la sífilis (1905) y la tularemia (1912).

Después de estos hechos comenzó el crecimiento y avance de la tecnología lo que dio a conocer grandes descubrimientos, desde aspectos morfológicos de los microorganismos hasta como se lleva cabo su actividad metabólica, la cual nos es de gran ayuda para poder identificar estos organismos en el laboratorio

2.       PROPÓSITO DEL SISTEMA DE PRÁCTICAS

2.1          Encuadre del sistema de prácticas dentro de la profesión

Los saberes prácticos que se les proporciona a los estudiantes en esta Unidad de Aprendizaje fortalecen su formación profesional, ya que serán capaces de tomar muestras de diversos orígenes anatómicos humanos de forma estéril y en las condiciones requeridas, así mismo podrá elegir los medios de cultivo adecuados para cada tipo de muestra, así como los requeridos para la orientación a la búsqueda de los microorganismos patógenos y podrá elegir e interpretar las pruebas bioquímicas y tinciones necesarias para la caracterización del microorganismo, así como emplear pruebas específicas para dicha caracterización; ya identificado el o los organismos patógenos utilizará antibiogramas para determinar la susceptibilidad ante diversos medicamentos, de esa forma orientará al médico hacia el tratamiento óptimo para el paciente, dependiendo del microorganismo encontrado y caracterizado.

2.2          Niveles de desempeño

Nivel 1.

Se realizan funciones rutinarias de baja complejidad. Se reciben instrucciones. Se requiere baja autonomía.

Nivel 2.

Se realiza un conjunto significativo de actividades de trabajo variadas y aplicadas en diversos contextos. Algunas actividades son complejas y no rutinarias. Presentan un alto grado de responsabilidad y autonomía en las decisiones. A menudo requiere colaboración con otros y trabajo en equipo.

Nivel 3.

Se requiere un importante nivel de toma de decisiones. Tiene bajo su responsabilidad recursos materiales con los que opera el área. Así como control de recursos financieros para adquisición de insumos.

Nivel 4.

Se desarrollan un conjunto de actividades de naturaleza diversa, en las que se tiene que mostrar creatividad y recursos para conciliar intereses. Se debe tener habilidad para motivar y dirigir grupos de trabajo.

Nivel 5.

Se desarrolla un conjunto de actividades de naturaleza diversa, en las que se tiene que mostrar un alto nivel de creatividad, así como buscar y lograr la cooperación entre grupos e individuos que participan en la implantación de un problema de magnitud institucional.

El nivel máximo que se obtendrá con las prácticas de Bacteriología Médica será el tres, ya que dentro del laboratorio adquirirá la autonomía suficiente para tomar decisiones sobre la toma y procesamientos de muestras biológicos. La complejidad adquirida en este laboratorio no es tan alta, ya que las técnicas manejadas son sencillas, pero no por eso menos importantes, debido a que se trata de enseñar a reportar resultados que se verán reflejados en un tratamiento prescrito por el médico y, además, se puede poner en riesgo la salud de un paciente.

Las actividades no son rutinarias, por lo menos en lo que concierne a la toma de muestra, además cada muestra tendrá un tratamiento y manejo especial.

La responsabilidad en el reporte de un resultado es muy alta, este nivel se asemeja mejor a los conocimientos que adquirirá el estudiante, además tendrá la capacidad para elegir el material que requiera y el manejo de recursos necesarios para la obtención de resultados fidedignos.

3.       DESCRIPCIÓN DEL SISTEMA DE PRÁCTICAS

3.1          Estructura y programa del sistema de prácticas

3.1.1           Competencia a ser abordada. El alumno será competente en toma de muestras biológicas, identificación y caracterización de microorganismos, así como reportar sus resultados.

3.1.2           Semana. Se cuenta con un total de 9 prácticas, se realizará a partir de la segunda semana de clase y posteriormente de acuerdo al cronograma presentado en el programa.

3.1.3           Prácticas. En la siguiente tabla se muestran las prácticas que se realizarán.

TEMA	SEMANA EN EL SEMESTRE	PRÁCTICA NECESARIA PARA LA UNIDAD DE COMPETENCIA	TIEMPO
1.       Introducción	Primera	Medios de cultivo y pruebas bioquímicas Pruebas de susceptibilidad antimicrobiana	Dos semanas
2.       Infecciones del aparato respiratorio	Segunda y tercera	Exudado faríngeo y procesamiento de esputo	Una semana
3.       Tracto gastrointestinal	Cuarta, quinta y sexta	Coprocultivo Aislamiento e identificación de Vibrio cholerae	Dos semanas
4.       Aparato urinario	Séptima semana	Urocultivo	Una semana
5.       Tracto genital	Octava y novena semana	Exudado vaginal y uretral	Una semana
6.       Piel y anexos	Decima y undécima semana	Secreciones y heridas	Una semana
7.       Sistema hematopoyetico	Doceava semana	No hay práctica	Una semana
8.       Infecciones del sistema nervioso	Semana 13	No hay práctica
9.       Infecciones oticas y oftálmicas	Semana 13	No hay práctica
10.   Infecciones sistémicas	Semana 14	No hay práctica
11.   Infecciones nosocomiales	Semana 15 y 16	No hay práctica

3.1.4           Todas las prácticas se llevan a cabo dentro del Laboratorio de Microbiología I en el área de Laboratorios del área de la Salud.

4.        PRÁCTICAS GENERALES DE SEGURIDAD

Debido al manejo de bacterias tanto patógenas como no patógenas, la seguridad es un punto fundamental en el desempeño de las prácticas.

La seguridad es tanto personal como de las instalaciones del Laboratorio, basándose en las Normas Oficiales Mexicanas, así como también en procesos de seguridad que se toman en cuenta y no son abordados en dichas normas.

En la siguiente tabla se marcan los posibles accidentes que pudieran existir en el desarrollo de la práctica así como la manera de evitarlos y el procedimiento a seguir en caso de existir alguno.

Tipo de peligro	Como evitarlo	Como proceder en caso de accidente
Quemadura	En el momento de esterilizar, sembrar o limpiar el área de trabajo,  se debe tener cuidado al estar empleando los mecheros o al estar en contacto con objetos calientes.	En caso de quemadura en piel: Poner el lugar lesionado al agua corriente, posteriormente poner alguna pomada especial contra quemaduras que se encuentre en el botiquín de primeros auxilios.
Cortadura	El manejo de material de vidrio en el laboratorio es continuo y, en algunas ocasiones, este material contiene algún cultivo  de bacterias, por lo que se debe de tener mucho cuidado al momento de estar maniobrando este tipo de material. Por lo cuál es obligatorio el uso de guantes desechables estériles.	En caso de cortadura con material del laboratorio ya sea limpio o contaminados se deben de seguir los siguientes pasos: 1.       Lavar con agua y jabón el área afectada. 2.       Adicionar alcohol, merthiolate o cualquier otro desinfectante, para evitar la infección de la herida. 3.       Cubrir la herida con gasa.

También es de suma importancia seguir las recomendaciones que marcan las Normas Oficiales Mexicanas, esto con la finalidad no sólo de evitar accidentes a los estudiantes, si no también de evitar un accidente  a las personas de intendencia y también evitar daños al medio ambiente. A  continuación se muestran las Normas Oficiales de Seguridad e Higiene, aplicables a las prácticas de Bacteriología Médica:

• NOM – 001 – STPS – 1999. Edificios, locales, instalaciones y áreas en los centros de trabajo. Condiciones de seguridad e higiene.
• NOM – 002 – STPS – 2000. Condiciones de seguridad, prevención, protección y combate de incendios en los centros de trabajo.
• NOM – 004 – STPS – 1999. Sistemas de protección y dispositivos de seguridad en la maquinaria y equipo que se utilicen en los centros de trabajo.
• NOM – 005 – STPS – 1998. Relativa a las condiciones de seguridad e higiene en los centros de trabajo para el manejo, transporte y almacenamiento de sustancias químicas peligrosas.
• NOM – 006 – STPS – 2000. Manejo y almacenamiento de materiales. Condiciones y procedimientos de seguridad.
• NOM – 017 – STPS – 2001. Equipo de protección personal. Selección, uso y manejo en los centros de trabajo.
• NOM – 018 – STPS – 2000. Sistema para la identificación y comunicación de peligros y riesgos por sustancias químicas peligrosas en los centros de trabajo.
• NOM – 022 – STPS – 1999. Electricidad estática en los centros de trabajo. Condiciones de seguridad e higiene.
• NOM – 025 – STPS – 1999. Condiciones de iluminación en los centros de trabajo.
• NOM – 026 – STPS – 1998. Colores y señales de seguridad e higiene, e identificación de riesgos por fluidos conducidos en tuberías.
• NOM – 052 – ECOL – 1993. Establece las características de los residuos peligrosos, el listado de los mismos y los límites que hacen a un residuo peligroso por su toxicidad al ambiente.
• NOM – 087 – ECOL – SSA1 – 2002. Protección ambiental. Salud ambiental. Residuos peligrosos biológicos infecciosos. Clasificación y especificaciones de manejo.

4.1          REGLAMENTO APLICABLE A LAS PRÁCTICAS Y AL ÁMBITO DONDE SE DESEMPEÑA.

El reglamento interno que rige al Laboratorio de Microbiología donde se llevan a cabo las prácticas de Bacteriología Médica presenta las normas de seguridad aplicables.

a)       Procedimientos generales

• El personal que ingrese al laboratorio debe tener una tarea programable a realizar.
• El Responsable de Laboratorio y el personal que en él labore deberá capacitarse a través de un profesional debidamente formado, registrando por escrito, detallado y firmado la capacitación recibida.
• Deberá leer y comprender estas normas, aceptarlas y establecer por escrito el compromiso de cumplirlas.
• El Responsable del Laboratorio solo permitirá el ingreso al lugar de trabajo a aquellas personas cuya tarea lo justifiquen y que hayan sido capacitadas e informadas de los riesgos a los que esta sometida con su ingreso.
• Se debe de elaborar un plan de contingencia que indique como proceder en caso de accidentes. El conocimiento de este plan también debe ser parte de las actividades de capacitación del grupo.

b) Ropa de protección

• Debe ingresar al laboratorio con bata blanca de algodón, manga larga y abotonada.
• Para el manejo de RPBI (Sangre, medios de cultivo, esterilización y limpieza) debe usarse guantes desechables de látex, anteojos y cubrebocas.

c) Prácticas generales

• Se prohíbe comer, fumar, beber y aplicarse cosméticos en el área de trabajo.
• Para pipetear deberá usarse pipetores automáticos, boquilla o perilla de látex.
• No deben tocarse con los guantes de trabajo zonas de los ojos, cara o cuerpo que estén sin protección.
• No debe tocarse con los guantes de trabajo elementos como picaportes, tapas de recipientes, teléfono, teclados, carpetas, mochilas, etc. Los guantes deberán desecharse al alejarse de la mesa de trabajo.
• El recipiente de desechos, en el lugar de trabajo, estará a no mas de 30 cm del personal que deba utilizarlo.
• Deberán lavarse las manos luego de trabajar con material viable, después de quitarse los guantes y antes de salir del laboratorio.
• Las muestras incubadas con mas de una semana serán desechadas para evitar contaminación.
• Todos los medios que estén en incubación deberán estar debidamente rotulados.
• Todo material que se utilice deberá esterilizarse antes y después de ser usado.

d) Prácticas específicas

• La mesa de trabajo se deberá limpiar y desinfectar antes y después de su uso o en caso de que exista algún derrame de material biológico infeccioso, utilizando el método de tratamiento in situ que establece la NOM – 087 – ECOL.
• Todo material contaminado deberá procesarse conforme a la NOM – 087 – ECOL, dando tratamiento in situ y a los que procedan y colocando en contenedores a los que requieren de otra disposición final.
• Las jeringas deberán descartarse usando un contenedor rígido para agujas y otros elementos punzocortantes. El cuerpo de la jeringa se descartará en bolsas rojas para RPBI.
• Todos los procedimientos deben ser realizados cuidadosamente para evitar derrames y salpicaduras.
• El abrir frascos que contengan líquidos deberá hacerse en sentido opuesto a la cara del operador para evitar salpicaduras.
• Si durante la centrífuga se rompe algún tubo se debe desinfectar la centrífuga utilizando la técnica de procedimiento in situ.
• Todo material, contenga o no crecimiento bacteriano, deberá abrirse cerca del mechero, evitando hablar y crear corrientes de aire.

ADEMÁS DEBE CUMPLIRSE EL REGLAMENTO DE USO Y MANEJO DE LABORATORIOS DEL ÁREA DE LA SALUD  APROBADO POR EL CONSEJO TÉCNICO DE LA UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICO BIOLÓGICAS Y FARMACÉUTICAS.